肝硬変は慢性肝疾患の最終段階であり、3つの特性の変化によって定義されています。 これらは、肝臓への進歩的な損傷の結果として瘢痕線維化であり、そしてびまん性損傷および線維症から肝臓全体の構造の破壊、慢性瘢痕化と組織再生の結果である瘢痕組織に囲まれたhepatocyctesの結節。 症状は通常、疾患の後期に開発し、肝硬変、肝細胞癌（肝癌）の開発のための巨大な危険因子である。
ポータルHypertensionCirrhosisは、門脈圧亢進症、その結果、肝臓の門脈血打撃に対する抵抗性の主要な原因である。 門脈圧亢進症は門脈、消化器系から肝臓に栄養豊富な血液をとり、主要容器内の圧力の増加である。 腹水、門脈体静脈シャントと脾腫：これは3つの主要な臨床結果を持っています。 腹水は多くの要因の結果として、腹腔内の流体の蓄積である。 門脈体循環シャントは、食道（食道静脈瘤としてマニフェスト）と直腸（hemmorhoids）などのサイトで副血管を通って流れの逆転があります。 食道静脈瘤が破裂、生命を脅かす出血を引き起こすことができます。 脾腫、また、脾臓の腫大、脾臓にバックアップすることができ、血液の長期的な混雑の結果として知られています。 脾臓は非常に血管の臓器であり、輻輳がサイズの劇的な増加をもたらすことができます。

肺DysfunctionLung関数はいくつかの理由のために妥協することができます。 減少した酸素に反応して発生した肺血管収縮（血管収縮）に影響を与える血流内の血管拡張の増加（血管拡張を引き起こす）​​の肝硬変の結果。 2,3-BPGと呼ばれるタンパク質は、肝臓によってクリアされ、血液細胞で、この結果は、代わりに活用するための体のためにそれを放出する酸素につかまっていません。 さらに、肺や腹部内の流体の蓄積は、（腹水インチ）撮影することができますどのくらいの空気に影響を与え、肺の動きを制限することができます。

内分泌DysfunctionTheの肝臓は、グルカゴン、成長ホルモンなど、体内で多くのホルモンや代謝産物を生成し、クリアされます。 それらの蓄積は、インスリンに対する体の感受性に影響を与え、抵抗は簡単に従うことができます。 十分に女性化乳房、インポテンス、男性の不妊に結果をクリアされないホルモン、女性、無月経、不妊、一般的に結果インチ の両方から、この結果は、アンモニアのクリアランスを減少させ、中枢神経系への神経伝達物質様作用を有する物質のクリアランスを減少させた。

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• たとえば、 サンドイッチ型アッセイは典型的には、検体の特異的結合メンバーと結合している染めラテックスまたは放射性同位元素などの検出可能なプローブと試験試料を混合して含む。 共役プローブは、被検体との複合体を形成しています。 これらの錯体は、バインディングは、抗体と三形成するために、検体の間で発生する固定化抗体のゾーンに到達 サンドイッチ複合体を。 サンドイッチ複合体は、検体を検出するためのゾーンにローカライズされています。 この手法は、定量的または半定量的な結果を得るために使用することができます。 代替技術は、 競争型アッセイである。 競争型のアッセイでは、ラベルは通常、サンプル中に存在するラベルが付いていない検体と抗体の結合について競合する標識された検体または検体、アナログである。 競合アッセイは、典型的には、ハプテン、一価つだけ抗体分子を結合することが可能である各ハプテンとして分析物の検出に使用されています。 このアッセイでは、存在する任意の検体は、検体に特異的な抗体（または他の結合剤）を有する複合体粒子にバインドします。 完全に、ルームメートの検体を阻害し、したがって、まだ検体を持つストライプ最初の行で複合体を形成することができるわけではありません。 検体がしきい値を下回っている場合、この阻害ラインは本​​質的に共役/削除バインドする役割を果たします。 共役粒子に抗体を認識する抗体で構成されて次の行は、 オーバーフローラインとして機能するだろう。 それは、しきい値レベルを超える検体レベルの場合にのみ（それによって形成するために着色されたラインを引き起こす）​​の粒子を結合します。 より具体的には、現在入手可能なラテラルフローアッセイは、サンプルの堆積点から下流に位置しており、検出ゾーンから上流されている複合体を採用しています。 サンプル自体が複合体を再懸濁および検出ゾーンにそれらを運ぶために依存されています。 また、追加の希釈剤は、共役粒子を再懸濁し、そして検出ゾーンに到達するのに役立つ、コンジュゲートパッドにサンプルを実行するサンプルを追加することができます。 いずれの場合も、サンプルの添加は、通常、粒子の再懸濁を支援するために共役粒子から上流に適用されます。 この信号は、検体の低レベルで表示されない場合がありますので、whichthey​​の状況が、使用することが制限されています。 従来のアッセイはまた、ため（血液）試料の強烈な赤色のため、またはサンプルフローの問題を引き起こす可能性があり、試料の粘度の信頼性の低いレンダリングされる場合があります。 分析装置は、吸湿発散性パッドとの通信にもある多孔質膜と液体のコミュニケーションであるコンジュゲートパッドで構成されています。 多孔質膜は、最初の捕捉試薬を固定化された検出ゾーンを持っています。 最初のキャプチャ試薬は、検出信号を生成するには、少なくとも検体の一部と検体共役複合体に結合するように構成されている。 最初のキャプチャ試薬は、抗原、ハプテン、タンパク質AまたはG、ニュートラ、アビジン、ストレプトアビジン、captavidin、プライマリまたはセカンダリの抗体、およびそれらの複合体から成る群から選択されることがあります。 第二捕獲試薬は、アッセイが正しく動作していることを示すために、共役、共役検体複雑な、または純粋なプローブに結合するように設定されているコントロールゾーン内に固定されている。 コンジュゲートパッドは、制御ゾーンで表示するためのプローブを含む他の、別のプローブ集団が含まれる場合もあります。 サンプルは共役と検出ゾーン間のデバイス上に堆積された後、バッファは、バッファの解放ゾーンの上流側から放出される。 バッファが存在する場合、プローブが検体で検出ゾーンにキャプチャされる検出ゾーンに向かってコンジュゲートパッドからプローブを洗浄し、肯定的な結果を得ることができます。 サンプルがない検体が含まれていない場合、検出ラインが負になります。 方法ではなく粒子から上流にある従来の場所に比べて、粒子からサンプルを下流に追加する必要があります。 試料の堆積した後、希釈剤は、粒子からの上流のテストストリップ上の点で、解放されます。 希釈剤は、彼らはテストストリップを流下できるように、粒子を再懸濁するために必要な流体を提供します。 この方法は、コンジュゲートパッドと吸湿発散性パッドと液体コミュニケーションにおける多孔質膜を有するラテラルフローアッセイ装置を提供する）分析のための特異的結合メンバーの定義、多孔質膜と結合した検出プローブを有するコンジュゲートパッドを、iの手順が含まれています 最初のキャプチャ試薬が固定化された検出ゾーンと第捕捉試薬を固定化した内のコントロールゾーン、制御ゾーンが検出ゾーンから下流に位置する、前記コンジュゲートパッドは、多孔質膜およびバッファ解放の上流に位置しています ゾーンには、共役パッドの上流にある、ⅱ）コンジュゲートパッドからデバイスの下流で分析物を含む被検試料を接触させる工程iii）のバッファは、サンプルアプリケーションの領域に検出プローブを運ぶようにバッファのリリースゾーンでバッファを解放する し、検出および制御ゾーンに、ⅳ）検出信号を検出する。 例えば、分析物は、その抗原物質、ハプテン、抗体、およびそれらの組み合わせを含めることができます。 検体としては、これらに限定されない、毒素、有機化合物、タンパク質、ペプチド、微生物、アミノ酸、核酸、ホルモン、ステロイド、ビタミン、薬物（違法な目的のために投与したものとしてだけでなく、治療目的で投与したものを含む）、 麻薬の仲介または副産物、細菌、ウイルス粒子、酵母、菌類、原生動物、および上記物質のいずれか、または抗体の代謝産物。 いくつかの分析物の具体例としては、フェリチン含んでいる;クレアチニンキナーゼMB（CK-MB）、ジゴキシン、フェニトイン、フェノバルビタール、カルバマゼピン、バンコマイシン、ゲンタマイシン、テオフィリン、バルプロ酸、キニジン、黄体形成ホルモン（LH）、卵胞刺激ホルモン（FSH）、エストラジオール 、プロゲステロン、C反応性タンパク質、リポカリン、IgE抗体、サイトカイン、ビタミンB2マイクログロブリン、糖化ヘモグロビン（GIy. Hb）は、コルチゾール、ジギトキシン、N-アセチルプロカインアミド（NAPA）、プロカインアミド、風疹に対する抗体など、風疹、 IgGおよび風疹のIgM、テストステロン;サリチル酸、アセトアミノフェン、B型肝炎ウイルス表面抗原（HBsAg）などのトキソプラズマIgG抗体（毒LGG）とトキソプラズマIgM抗体（毒LGM）のようなトキソプラズマ症に対する抗体、B型肝炎コア抗原に対する抗体など、 ヒト免疫不全ウイルス1および2（HIV 1および2）;ヒトT細胞白血病ウイルス1および2（HTLV）、抗B型肝炎コア抗原IgG及びIgM（抗HBC）としてB型肝炎e抗原（HBeAg） 、インフルエンザウイルス;甲状腺刺激ホルモン（TSH）、チロキシン（T4）、総トリヨードサイロニン（T3合計）、遊離トリヨードサイロニン（T3無料）carcinoembryoic抗原（CEA）、リポ蛋白、B型肝炎e抗原（抗HBe）に対する抗体 コレステロール、トリグリセリド、およびアルファフェトプロテイン（AFP）。 虐待や規制物質の薬が含まれるが、アンフェタミンに限定されるものではありません。メタンフェタミン、そのようなlibriumやバリウムなどのベンゾジアゼピン、;などのアモバルビタール、セコバルビタール、ペントバルビタールフェノバルビタール、およびバルビタールなどバルビツール酸塩、カンナビノイドなど、ハシシなどと マリファナ、コカイン、フェンタニル、LSD、メタカロン、フェンシクリジン;とpropoxyheneなどのヘロイン、モルヒネ、コデイン、ヒドロモルフォン、ヒドロコドン、メサドン、オキシコドン、オキシモルフォンとアヘンなどの麻薬、。 他の潜在的な検体はありません米国特許で説明されることがあります。 6436651。 本明細書において、 試験試料とは、一般的に検体を含むことが疑われる物質を指す。 試験サンプルは、例えば、ソース、などの材料を使用して前処理技術など、これらに限定されない、ろ過、沈殿、希釈、蒸留、混合、濃度、干渉成分の不活性化から直接得られた​​材料を含んでもよい 試薬の添加、溶解などがあります。 試験サンプルは、このような、血液、間質液、唾液、接眼レンズ液、脳脊髄液、汗、尿、牛乳、腹水、粘液、滑液、腹水を含む生理的液体、のように、biologicalsourceに由来することができる 膣分泌液、羊水等が挙げられる。 生理学的流体に加えて、他の液体試料は、水、食品、などとして、使用することができます。 従来のラテラルフロー法では、サンプルは、通常、サンプルは、テストを続行できるように再懸濁粒子を助けることができるように固定化した共役粒子の位置から上流に適用されます。 対照的に、しかしながら、本発明は、低ボリュームのサンプル、例えば、として、血液ベースのアッセイで関連付けられている問題を軽減または排除するためにサンプルを適用するための新規な方法および/または場所を開示している。 公知のアッセイは検出ゾーンにして複合体粒子を含む、領域を介して試料を移動します。 これらの公知のアッセイのいくつかが複合体粒子に、検出ゾーンにサンプルを移動する液体希釈剤又は バッファを使用します。 公知のアッセイとは対照的に、インスタントデバイスは、サンプルが共役粒子から下流thedepositedすることができます。 希釈剤は、テスト結果を提供するためにコンジュゲートパッドダウンと細胞膜に沿って遠くに移動できるように、非常に効率的に検出プローブを再懸濁するのに役立ちます。 従来のラテラルフロー装置内の液体試料が抱合体粒子を再懸濁するために使用されますので、このメソッドは、カウンタ – 直感的です。 加えて、従来の順序で免疫し、結合が発生するためのサンプルと粒子が接触していることが望まれている。 検出ゾーンは、試薬を捕捉固定化しています。 サンプル·アプリケーションのゾーンが固定化した粒子から下流にあるコンジュゲートパッド材料上の場所であるか、それが膜上にフロントの場所（上流の検出ゾーン）であってもよいか、の間に配置され、別の材料であってもよい コンジュゲートパッド、検出ゾーンと膜。 装置は、さらにサンプル·アプリケーションのゾーンと希釈剤放出ゾーンとサンプルの間に位置するコンジュゲートパッドの前に装置の上流端に希釈放出ゾーンを使用します。 吸湿発散性パッドはデバイスのthedownstream端に多孔質膜の反対側の端部と液体連通している。 使用され、サンプルはサンプル·アプリケーションのゾーンに適用され、一定の期間後に、希釈剤は解放されます。 いくつかの分析物の具体例としては、フェリチン含んでいる;クレアチニンキナーゼMB（CK-MB）、ジゴキシン、フェニトイン、フェノバルビタール、カルバマゼピン、バンコマイシン、ゲンタマイシン、テオフィリン、バルプロ酸、キニジン、黄体形成ホルモン（LH）、卵胞刺激ホルモン（FSH）、エストラジオール 、プロゲステロン、C反応性タンパク質、リポカリン、IgE抗体、サイトカイン、ビタミンB2マイクログロブリン、糖化ヘモグロビン（GIy. Hb）は、コルチゾール、ジギトキシン、N-アセチルプロカインアミド（NAPA）、プロカインアミド、風疹に対する抗体など、風疹、 LGGと風疹のIgM、テストステロン;サリチル酸、アセトアミノフェン、B型肝炎ウイルス表面抗原（HBsAg）などのトキソプラズマIgG抗体（毒LGG）とトキソプラズマIgM抗体（毒LGM）のようなトキソプラズマ症に対する抗体、B型肝炎コア抗原に対する抗体など、 ヒト免疫不全ウイルス1および2（HIV 1および2）;ヒトT細胞白血病ウイルス1および2（HTLV）、抗B型肝炎コア抗原IgG及びIgM（抗HBC）としてB型肝炎e抗原（HBeAg） 、インフルエンザウイルス;甲状腺刺激ホルモン（TSH）、チロキシン（T4）、総トリヨードサイロニン（T3合計）、遊離トリヨードサイロニン（T3無料）carcinoembryoic抗原（CEA）、リポ蛋白、B型肝炎e抗原（抗HBe）に対する抗体 コレステロール、トリグリセリド、およびアルファフェトプロテイン（AFP）。 虐待や規制物質の薬が含まれるが、アンフェタミンに限定されるものではありません。メタンフェタミン、そのようなlibriumやバリウムなどのベンゾジアゼピン、;などのアモバルビタール、セコバルビタール、ペントバルビタールフェノバルビタール、およびバルビタールなどバルビツール酸塩、カンナビノイドなど、ハシシなどと マリファナ、コカイン、フェンタニル、LSD、メタカロン、フェンシクリジン;とpropoxyheneなどのヘロイン、モルヒネ、コデイン、ヒドロモルフォン、ヒドロコドン、メサドン、オキシコドン、オキシモルフォンとアヘンなどの麻薬、。 他の潜在的な検体はありません米国特許で説明されることがあります。 それは、デバイスが同じ効果を持つ他の方法で構成することができますように、用語 側方流動は、制限する記述しないであることを意味することに留意すべきである。 ラジアル方向または垂直方向の流れのデバイスは、容易に本発明の精神から逸脱することなく、本発明と同じ原理を用いて、例えば、想定することができます。 に示すように、装置20は、必要に応じて硬質材料24でサポートされている多孔質膜22を含んでいます。 多孔質膜22は、検出ゾーン（または回線）30を有する。 一つの特定の態様において、多孔質膜22は、ニトロセルロース及び/又はポリエーテルスルホン材料から形成される。 これは、用語 ニトロセルロースは単独でニトロセルロース、硝酸など1〜7個の炭素原子を有する脂肪族カルボン酸のような他の酸の混合エステルであってもよいセルロースの硝酸エステルを指すことを理解すべきである。 ウィッキングパッド26は、一般的に全体の多孔質膜22を介して移行した流体を受け取ります。 当技術分野でよく知られているように、吸湿発散性パッド26は、膜22を介して毛細管現象と流体の流れを促進するのに役立つ可能性があります。 装置20は、希釈剤放出ゾーン34を有する。 一実施形態では、希釈剤放出ゾーン34は、希釈剤38を保存することができるその中に希釈タンク36を有している。 希釈剤38は、代わりに別々のタンクから供給されることがあります。 希釈剤28は、本発明で使用される検出プローブを運び去るでしょう、任意の液体であってもよい。 適切なdiluentsincludeリン酸の例としては生理食塩水（PBS）溶液（7.2のpH）は、バッファリングされ、トリス緩衝生理食塩水（TBS）溶液（8.2のpH）、または2 – （N-モルホリノ）エタンスルホン酸（MES）（5.3のpH）。 共役パッド40は、希釈剤が通過することが可能となるを通して材料から形成される。 共役パッド40は、例えば、ガラス繊維から形成されることがあります。 サンプルは、アプリケーションゾーン42に接触した後、希釈剤38は、希釈剤放出ゾーン34にリリースされています。 希釈剤38が一体タンクにより、又はピペットまたは当業者に公知の任意の他の有効な手段とするなど、別のソースによって適用されることがあります。 視覚的にまたはインストゥルメンタルデバイスによって検出された信号を生成する任意のsubstancegenerallyできる、検出プローブとして使用することができます。 検出プローブとしての使用に適したいくつかの酵素がない米国特許に開示されている。 4275149。 酵素/基質システムの一例は、酵素アルカリホスファターゼ基質とニトロブルーテトラゾリウム-5 – ブロモ-4 – クロロ-3 – インドリルリン酸またはその誘導体もしくは類似体、または基質4 – メチルウンベリフェリル – ホスフェートである。 他の適当な共役粒子は、米国特許の初めで説明されることがあります。 蛍光性化合物は、蛍光分子、高分子、デンドリマー、粒子などがあります。 さらに、合成微粒子を利用してもよい。 例えば、一実施形態では、afluorescentまたは着色色素で標識されているラテックス微粒子が利用されています。 すべてのラテックス微粒子は、本発明で使用されるかもしれませんが、ラテックス微粒子は、通常、ポリスチレン、ブタジエンスチレン、ポリブチレンテレフタレートstyreneacrylicビニルポリマー、ポリメチルメタクリレート、polyethylmethacrylate、スチレン – 無水マレイン酸共重合体、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルピリジン、ポリジビニル、アクリロニトリル、から形成される 塩化ビニル – アクリレートなど、またはヒドロキシル基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド、またはヒドラジド誘導体。 他の好適な微粒子は、米国特許の初めで説明されることがあります。 5670381と5252459。 適切な蛍光粒子の市販の例では、商品名 FluoSphere（赤605分の580）と TransfluoSphere（620分の543）と同様に、 テキサス·レッド、5の下にMolecular Probes社によって販売蛍光カルボキシル化ミクロスフェア、（株）を含む – また、Molecular Probes社から販売されている6 – カルボキシ、Inc。は、特定の一実施形態では、例えば、粒子形状が球状である。 しかし、それはさらに、他の形状もそのような板、棒、円盤、棒、管、不規則な形状などのように、本発明によって企図されていることが理解されるべきである、粒子の大きさも異なる場合があります。 例えば、 ミクロンスケール粒子がしばしば望まれている。 利用する場合、このような ミクロンスケール粒子は、約1ミクロンからいくつかの実施形態では約100ミクロンまで、約1ミクロンtoabout 1、000ミクロンの平均サイズを有することができ、いくつかの実施形態では、約1ミクロン〜約10 ミクロン。 同様に、 ナノスケール粒子も利用されることがあります。 このような場合においては、粒子は、共役粒子を形成するために付着されている特定の特異的結合メンバーと変更される場合があります。 例えば、免疫特異的結合メンバーは、組換えDNA法またはペプチド合成によって形成されたものも含めて、それらの抗原、ハプテン、アプタマーは、抗体（プライマリまたはセカンダリ）、および複合体が含まれる場合があります。 抗体は、モノクローナルまたはポリクローナル抗体、組換えタンパク質またはそれらの混合物（s）またはその断片（秒）と同様に、抗体や他の特異的結合メンバーの混合物であってもよい。 そのような抗体および特異的結合メンバーとして使用するための適性の準備の詳細は、当業者に周知である。 他の一般的な特異的結合対が含まれますが、これらに限定されない、ビオチンとアビジン（またはその誘導体）、ビオチンとストレプトアビジン、炭水化物とレクチン、プローブと標的核酸を検出するためのDNAハイブリダイゼーションアッセイで使用される核酸配列を取り込む含む相補的な塩基配列（ アミノ酸配列）、組換え法、エフェクターと受容体分子、ホルモンとhormonebindingタンパク質、酵素補因子、酵素、酵素阻害剤や酵素などによって形成されたものを含む相補的なペプチド配列。 さらに、特異的結合対は、オリジナルの特異的結合メンバーの類縁体であるメンバーを含めることができます。 粒子の表面は極性基の比較的高い表面濃度が含まれている可能性があるため、表面官能基はまた、共同モノマーの官能として組み込むことができる。 例えば、いくつかの実施形態では、試薬は、高分子電解質が含まれる場合があります。 高分子電解質は、正味の正電荷または負電荷、または一般的に中性である正味の電荷を持つことができます。 正味の正電荷を有するpoiyelectrolytesいくつかの好適な例としては、ポリリジン（セントルイスのシグマアルドリッチケミカル株式会社、MOから市販されている）、ポリエチレンイミンに限定されていません。エピクロロヒドリン官能化ポリアミンおよび/またはポリアミド 、ポリ（ジメチルアミン-CO-エピクロロヒドリン）など、polydiallyldimethyl-塩化アンモニウム、四級ammoniumwater水溶性モノマーをグラフトしたセルロースコポリマーまたはセルロース誘導体のようなカチオン性セルロース誘導体;など。 第四級アンモニウム水溶性モノマーを含有するセルロース誘導体である一つの特定の実施形態では、CelQuat？SC-230MまたはH-100（ナショナルスターチChemicalから入手可能、（株））では、利用することができる。 正味の負電荷を有する高分子電解質のいくつかの好適な例としては、例えば、ポリ（エチレン-co-メタクリル酸、ナトリウム塩）などのポリアクリル酸、これらに限定されないなどがあります。 また、他の高分子電解質を用いてもよいことを理解すべきである。 例えば、適当な両親媒性高分子電解質のいくつかの例としては、ポリ（スチリル-BN-メチル2 – ビニルピリジニウムヨウ化物）とポリマーのソースから入手できます。どちらもポリ（スチリル-B-アクリル酸）、これらに限定されない ドーヴァル、カナダの商標または登録商標です。 最初のキャプチャ試薬は、検体と共役粒子間に形成された複合体の定常結合部位として機能します。 検出ゾーン30に到達すると、これらの結合部位の一つは、プローブの特異的結合メンバーによって占められている。 しかし、分析対象物の自由な結合部位は、 固定化されたCAPTに結合することができる
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